ЭМБРИОГЕННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ ДЛИТЕЛЬНО ПРОЛИФЕРИРУЮЩИХ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ Larix sibirica in vitro
М.Э. Пак1, А.С. Иваницкая1, Л.М. Двойнина2, И.Н. Третьякова1
1Институт леса им. В. Н. Сукачева СО РАН, 660036, Красноярск, Академгородок, 50/28
mtavi@bk.ru
2Сибирский федеральный университет, 660041, Красноярск, просп. Свободный, 79
slav.lyana@yandex.ru
Ключевые слова: Larix sibirica, соматический эмбриогенез, эмбриогенные культуры, продуктивность, длительная пролиферация, Larix sibirica, somatic embryogenesis, embryogenic cultures, productivity, long-term proliferation
Страницы: 27-38
Аннотация
Исследовали эмбриогенный потенциал клеточных культур Larix sibirica, полученных при использовании в качестве эксплантов зиготических зародышей деревьев, устойчивых к лиственничной почковой галлице. Изолированные незрелые зародыши лиственницы культивировали на среде АИ по методике И. Н. Третьяковой (2012). В результате эксперимента получили 15 пролиферирующих эмбриогенных клеточных линий (Кл) Larix sibirica из эмбриокультуры. Кл лиственницы отличались разной эмбриогенной продуктивностью, содержанием и размером соматических зародышей, их способностью созревать и прорастать, а также образовывать жизнеспособные регенеранты. Число глобулярных соматических зародышей в молодых Кл (до одного года) в 1 г сырой эмбрионально-суспензорной массе (ЭСМ) в среднем колебалось от 2040 до 11 103. Пролиферативная активность Кл сохранялась в течение 2-6 лет. При добавлении в питательную среду АИ абсцизовой кислоты (АБК) происходили морфогенез и созревание соматических зародышей в течение 45 сут. Число созревших соматических зародышей у разных Кл колебалось от 12 до 1221 шт. на 1 г сырой ЭСМ. Мелкие соматические зародыши гибридной Кл5 не созревали на среде с АБК. Наблюдались разные аномалии в морфогенезе соматических зародышей в процессе созревания: отклонения в развитии доменов зародыша и цитокинезе. Наименьшее число аномальных зародышей отмечено у Кл4. У данной линии жизнеспособные зародыши составили (83.31±3.00) %. Прорастание соматических зародышей происходило на безгормональной среде АИ и начиналось с растяжения гипокотиля и удлинения корешка. Соматические сеянцы переносили в почвенный субстрат в условия ростовой камеры, а затем высаживали в теплицу Института леса СО РАН (2013 г.). Так была создана коллекция эмбриогенных клеточных линий L. sibirica, которая будет использоваться для плантационного лесовыращивания лиственницы в Сибири.
DOI: 10.15372/SJFS20160103 |
